הרצאה 1 - חומצות אמינו
סוגי חומצות אמינו:
- התכונה של כל קבוצה אמינית נקבעת על סמך תכונות השייר ומחלקת אותן ל-5 קבוצות:
- לא פולריות (non polar): שייר פחמימני, דוחה מים
- פולריות לא טעונות (polar uncharged): מסיסות במים, אך ללא מטען חשמלי
- ארומטיות: בעלות ריח ויכולת לבלוע אור באורכי גל מסוים, בגלל צורת הטבעת הסגורה
- טעונות חיובית (positively charged): נושאת מטען חיובי, חשוב לזכור את: היסטידין (His), ארגנין (Arg), ליזין (Lys)
- טעונות שלילית (Negativily charged): נושאת מטען שלילי, חשוב לזכור את: אספרטט (Asp), גלוטאמט (Glu)
עקומת טיטרציה:
- כאשר PH = PK הקבוצה במצב של שיווי משקל בין הצורה המיוננת ללא מיוננת
- אזור PI הוא ה-PH שבו סך המטענים של הקבוצות הכימיות בחומצה האמינית שווה לאפס
- חישוב PI: לוקחים את שתי נקודות הPK שביניהן המטען יהיה אפס, ומחשבים את הממוצע ביניהן
- סביב קבועי היוניזציה (pk1, pk2, pkr) יהיה אזור בופר -> שחרור יוני המימן מנטרל את יוני ההידרוקסיד וגורם להתנגדות לשינוי רמת ה-ph.
- ב-PI כל הצורונת שחררו יונים והמטען שווה לאפס -> יש קפיצה חדה ברמת ה-PH
- סדר שחרור היון הוא: קצה קרבוקסילי -> שייר טעון (אם קיים) -> קצה אמיני
לדוגמא - עקומת טיטרציה של גליצין:

שיטות הפרדה בין חומצות אמינו:
- הפרדה לפי מטען:
- קטודה (טעונה שלילית) -> מושכת קטיונים (טעונים חיובית).
- אנודה (טעונה חיובית) -> מושכת אניונים (טעונים שלילית).
- הפרדה לפי גודל: חלבונים גדולים לא נכנסים לנקבים של הפולימר ולכן נעים מהר דרך הקולונה
- כרומוטוגרפיה על מחליף קטיונים: הממברנה מלאה בחרוזי פולימר טעונים שלילית ולכן האניונים לא נקשרים אליהם ויוצאים ראשונים
חישוב מטען של פוליפפטיד:
- רושמים את כל האזורים שיכולים לתרום למטען (כולל שיירים).
- מציירים ציר PH, כאשר כל שנתה היא אזור יינון רלוונטי (הקצה האמיני והקרבוקסילי, והשיריים שתורמים למטען).
- כך נוכל לראות מה המטען של הפוליפפטיד בכל רמת PH רלוונטית
- חשוב לזכור: ציסטאין וטירוזין יכולות להיות שליליות ב PH גבוה